Вирус Эпштейна–Барр
ВАЖНО!
Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
Вирус Эпштейна-Барр: причины появления, симптомы, диагностика и способы лечения.
Определение
Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) присутствует у большинства людей, пожизненно сохраняясь в организме переболевшего и являясь триггером (спусковым механизмом) различных заболеваний. Известно, что во многих случаях первичный контакт с ВЭБ происходит в первом десятилетии жизни, вызывая персистирующую (упорно протекающую) инфекцию. В раннем детстве болезнь обычно протекает бессимптомно или со скудной симптоматикой. Первичное инфицирование ВЭБ в 10-20-летнем возрасте в 40% случаев вызывает респираторные инфекции, у 18-25% больных диагностируется инфекционный мононуклеоз.
Вирус Эпштейна-Барр может инфицировать различные типы клеток, включая B-клетки иммунной системы (разновидность лейкоцитов — белых кровяных телец) и эпителиальные клетки слизистых оболочек.
ВЭБ является представителем ДНК-содержащих вирусов из семейства Herpesviridae (герпесвирусы), подсемейства гамма-герпесвирусов и рода лимфокриптовирусов. В процессе репликации (самокопирования) вируса экспрессируется свыше 70 различных вирусспецифических белков. В настоящее время выделены группы иммуногенных белков, определение антител к которым дает возможность дифференцировать стадию инфекции (ЕА — ранний антиген, ЕВNА-1 — ядерный антиген, VCA — капсидный антиген, LMP — латентный мембранный белок).
Причины появления заболеваний, вызванных вирусом Эпштейна-Барр
Вирус может распространяться от человека к человеку через биологические жидкости (воздушно-капельный путь передачи). Вот почему инфекционный мононуклеоз, одно из самых известных заболеваний, вызываемых ВЭБ, называют «болезнью поцелуев».
Другой способ заражения — контактно-бытовой (вирус передается через зубные щетки, столовые приборы, полотенца и т.д.). ВЭБ также может распространяться через кровь и сперму.
ВЭБ размножается в В-лимфоцитах и эпителиальных клетках, в связи с чем характерно многообразие клинических проявлений данной патологии. Важной отличительной чертой вируса является то, что он не тормозит и не нарушает размножение В-лимфоцитов, а, наоборот, стимулирует его. В этом заключается особенность возбудителя — он размножается в клетках иммунной системы, заставляя их клонировать свою, вирусную, ДНК.
Хронический воспалительный процесс, вызванный ВЭБ, приводит к структурным и метаболическим нарушениям пораженных тканей, что является причиной возникновения разнообразной соматической патологии.
Классификация вируса Эпштейна-Барр
Единой классификации вирусной инфекции Эпштейна-Барр (ВИЭБ) не существует, к использованию в практической медицине предлагается следующая:
- по времени инфицирования — врожденная и приобретенная;
- по форме заболевания — типичная (инфекционный мононуклеоз) и атипичная: стертая, асимптомная, с поражением внутренних органов;
- по тяжести течения — легкая, средней степени и тяжелая;
- по продолжительности течения — острая, затяжная, хроническая;
- по фазе активности — активная и неактивная;
- смешанная инфекция — чаще всего наблюдается в сочетании с цитомегаловирусом.
Симптомы вируса Эпштейна-Барр
Ниже представлен неполный список заболеваний, с которыми ассоциирован вирус Эпштейна-Барр.
- Инфекционный мононуклеоз (железистая лихорадка, болезнь Филатова) — распространенное инфекционное заболевание, основными проявлениями которого является подъем температуры до высоких значений, увеличение лимфатических узлов, воспаление слизистой оболочки глотки, увеличение печени и селезенки. ВЭБ в данном случае проникает через эпителий слизистых оболочек верхних дыхательных путей.
- Лимфогранулематоз (болезнь Ходжкина) и некоторые виды неходжкинских лимфом — группа заболеваний, объединенных злокачественной моноклональной пролиферацией лимфоидных клеток в лимфоузлах, костном мозге, селезенке, печени и желудочно-кишечном тракте.
- Синдром хронической усталости — состояние, характеризующееся длительным чувством усталости, которое не проходит после продолжительного отдыха.
- Синдром Алисы в стране чудес — состояние, клиническим проявлением которого является нарушение ощущения своего тела и отдельных его частей. Человек ощущает себя или части своего тела очень большими или очень маленькими по сравнению с действительностью.
- Гепатит, спровоцированный ВЭБ, часто является осложнением инфекционного мононуклеоза. Появляется слабость, тошнота, желтушность кожи и слизистых, увеличивается печень.
- Герпетическая инфекция в виде генитального или лабиального (на губах) поражения. Также возможен стоматит, вызванный ВЭБ. При активации инфекции появляется чувство жжения и боль, а затем множество маленьких пузырьков.
- Посттрансплантационная лимфопролиферативная болезнь — вторичное злокачественное заболевание, развивающееся после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (метод лечения, применяемый при онкологии, заболеваниях крови и др.), ассоциированное с ВЭБ-инфекцией.
- Рассеянный склероз — хроническое аутоиммунное заболевание, при котором поражается миелиновая оболочка нервных волокон головного и спинного мозга. Характеризуется большим количеством симптомов и зависит от уровня поражения: часто снижается мышечная сила, угасают рефлексы, появляются параличи (обездвиженность) различных локализаций.
- Волосатая лейкоплакия — на слизистой оболочке языка по бокам, на спинке либо на его нижней части появляются белые участки с шероховатой поверхностью. Они безболезненны и не причиняют существенного дискомфорта. Основная опасность заключается в возможности озлокачествления измененных клеток слизистой.
- Назофарингеальная карцинома — злокачественное образование глотки. Среди его симптомов часто встречаются заложенность носа, потеря слуха, частые отиты, появление крови в слюне, кровянистые выделения из носа, увеличение лимфоузлов, головные боли.
- Аутоиммунный тиреоидит — хроническое заболевание щитовидной железы, при котором в организме образуются антитела к тканям щитовидной железы. При данном заболевании возможно появление зоба (увеличение щитовидной железы), развитие симптомов гипотиреоза: отеки, повышенная утомляемость, сонливость, запоры, сухость кожи, выпадение волос.
Диагностика вируса Эпштейна-Барр
Диагностика ВЭБ, независимо от формы заболевания, должна проводиться с учетом данных эпидемиологического анамнеза, клинической картины и результатов лабораторного обследования.
Лабораторное обследование включает:
- вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК в крови (Epstein Barr virus, DNA);
Вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК (Epstein Barr virus, DNA) в крови
Определение ДНК вируса Эпштейна-Барр в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени». Вирус Эпштейна — Барр (ВЭБ) является причиной инфекционного мононуклеоза. С вирусом Эпштейна-Барр связывают также этиологию некоторых онкологических…
580 руб
- вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК в выпоте (Epstein Barr virus, DNA);
- вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК в моче (Epstein Barr virus, DNA);
Вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК (Epstein Barr virus, DNA) в моче
Определение ДНК вируса Эпштейна-Барр в моче методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени». Вирус Эпштейна — Барр (ВЭБ) является причиной инфекционного мононуклеоза. С вирусом Эпштейна — Барр связывают также этиологию некоторых онкологических, …
410 руб
- вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК в соскобе эпителиальных клеток слизистой носа (Epstein Barr virus, DNA);
- вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК в соскобе эпителиальных клеток ротоглотки (Epstein Barr virus, DNA);
- вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК в сыворотке крови (Epstein Barr virus, DNA);
- вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК в слюне (Epstein Barr virus, DNA);
Вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК (Epstein Barr virus, DNA) в слюне
Определение ДНК вируса Эпштейна-Барр в слюне методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени». Вирус Эпштейна — Барр (ВЭБ) является причиной инфекционного мононуклеоза. С вирусом Эпштейна — Барр связывают также этиологию некоторых онкологических,…
410 руб
- вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК в спинномозговой жидкости (Epstein Barr virus, DNA);
- вирус Эпштейна-Барр, определение ДНК в секрете простаты, эякуляте (Epstein Barr virus, DNA);
- антитела класса IgG к нуклеарному антигену вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ NA IgG, Epstein-Barr Virus Nuclear Antigen IgG, EBNA IgG);
- антитела класса IgM к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ VCA-IgM, Epstein-Barr Virus Capcid Antigen IgM, EBV VCA-IgM);
- антитела класса IgG к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр (anti- Epstein-Barr viral capsid antigens IgG, EBV VCA IgG);
- антитела класса IgG к раннему антигену вируса Эпштейна-Барр (анти-ВЭБ EA-D IgG; Epstein-Barr Virus Antibody to Early D Antigen (EA-D), IgG; anti-EBV EA-D IgG).
К каким врачам обращаться
При обнаружении симптомов ВЭБ-инфекции необходимо обратиться за консультацией к
врачу-педиатру
,
терапевту
или инфекционисту.
При увеличении одного или группы лимфатических узлов, постоянной слабости, длительном малопродуктивном кашле, увеличении объема живота, частых болях в животе, костях может потребоваться консультация онколога, гематолога и других узких специалистов.
Лечение вируса Эпштейна-Барр
Специального лечения или вакцины против ВЭБ не разработано. Поскольку инфекция вызвана вирусом, антибиотики неэффективны.
Лечение направлено на устранение общих симптомов и включает достаточный отдых, восполнение жидкости, прием болеутоляющих и жаропонижающих средств, рекомендуется избегать занятий контактными видами спорта и тяжелой атлетикой.
При тяжелых формах инфекции назначают противогерпетические средства.
Для лечения злокачественных опухолей разработаны специальные протоколы терапии (включая различные комбинации химио- и лучевой терапии и операции), которые реализуются в центрах, оказывающих помощь пациентам онкологического профиля.
Осложнения
В некоторых случаях инфекции, вызванные ВЭБ, могут привести к осложнениям, среди которых разрыв селезенки, анемия (снижение уровня гемоглобина и количества эритроцитов — красных кровяных телец, которые переносят кислород), низкий уровень тромбоцитов (тромбоцитопения), гепатит (воспалительное заболевание печени), миокардит (воспалительное заболевание сердечной мышцы), энцефалит, менингит (воспалительные заболевания головного и/или спинного мозга и их оболочек), синдром Гийена-Барре (тяжелое заболевание, при котором поражается нервная система).
Профилактика вируса Эпштейна-Барр
В настоящее время специфической профилактики (вакцинации) против инфицирования вирусом Эпштейна-Барр не существует. Основной проблемой разработки прививки от этой вирусной инфекции является разнообразие белковых структур в различных фазах жизни вируса.
Поэтому для предупреждения ВЭБ рекомендуется соблюдать правила личной гигиены, выполнять общеукрепляющие мероприятия (умеренная физическая активность, нормализация рациона, отказ от вредных привычек), а также своевременно лечить хронические заболевания.
Источники:
- Чупрынова М.Ю., Потрохова Е.А. Роль вируса Эпштейна-Барр в патологии органов желудочно-кишечного тракта. — ГБОУ ВПО Омская государственная медицинская академия Минздрава России. Обзор литературы// Журнал «Детские инфекции». № 2, 2013. С. 27-30.
- Скворцова Ю.В., Шелихова Л.Н., Мякова Н.В. и соавт. Лимфоидные неоплазии после аллогенных трансплантаций гемопоэтических стволовых клеток. Случай развития вторичной лимфомы Ходжкина, дифференциальная диагностика с посттрансплантационным лимфопролиферативным заболеванием.
- Шестакова И.В. Лечить или не лечить Эпштейна-Барр вирусную инфекцию: подробный обзор различных тактик. Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. Журнал для непрерывного медицинского образования врачей. № 5, 2013. С. 12-23.
- Панасенко Л.М., Краснова Е.И., Карцева Т.В., Нефедова Ж.В., Извекова И.Я. Эпштейна-Барр вирусная инфекция у детей: клиническая характеристика, современные аспекты диагностики, дифференцированный подход к лечению. Лечащий врач, журнал. № 11, 2019. С. 24-28.
ВАЖНО!
Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
Информация проверена экспертом
Лишова Екатерина Александровна
Высшее медицинское образование, опыт работы — 19 лет
Поделитесь этой статьей сейчас
Выкидыш
Выкидыш: причины появления, симптомы, диагностика и способы лечения.
Цирроз печени
Цирроз печени: причины появления, симптомы, диагностика и способы лечения.
Ветряная оспа
Ветряная оспа: причины появления, симптомы, диагностика и способы лечения.
Герпес
Герпес: причины появления, симптомы, диагностика и способы лечения.
Антитела к Epstein-Barr virus, IgM (иммуноблот)
[07-176] Антитела к Epstein-Barr virus, IgM (иммуноблот)
5105 руб.
Вирус Эпштейна — Барр (Epstein-Barr virus, EBV) относится к герпес-вирусам и является одним из наиболее распространенных среди взрослого населения. Основная цель диагностики — дифференциация между острой и прошедшей инфекцией. Иммунный ответ при EBV-инфекции характеризуется образованием антител к капсидному (EBV-CA), ядерному (EBNA) и раннему (EBV-EA) антигенам EBV. На ранней стадии заболевания обнаруживаются антитела IgM и IgG к вирусному капсидному антигену. Выявление антител класса IgM к капсидному антигену (EBV-CA) считается достоверным индикатором наличия острой EBV-инфекции. Исследование предназначено для выявления антител IgM в сыворотке крови для диагностики заболеваний, возбудителем которых является EBV (инфекционный мононуклеоз, лимфома Беркитта, назофарингеальная карцинома).
Синонимы русские
Антитела класса IgM к вирусу Эпштейна — Барр, анти-VCA класса IgM, антитела к инфекционному мононуклеозу.
Синонимы английские
EBV-VCA Antibodies, IgM, Antibodies to Epstein-Barr Virus Viral Capsid Antigen, IgM, Infectious Mononucleosis (Epstein-Barr Virus Antibody to Viral Capsid Antigen) IgM, EBV VCA-IgM Ab.
Метод исследования
Иммуноблотинг.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Вирус Эпштейна — Барр — это широко распространённый вирус семейства Herpesviridae, который размножается преимущественно в B-лимфоцитах, но также может инфицировать Т-лимфоциты и эпителиальные клетки. Путь передачи — воздушно-капельный. Пик заболеваемости — 15-25 лет. Первый контакт с вирусом Эпштейна — Барр происходит, как правило, в детском возрасте (до 10 лет), что приводит к развитию латентной бессимптомной или малосимптомной инфекции.
Инфицирование у взрослых людей приводит к развитию инфекционного мононуклеоза, который у большинства заболевших сопровождается лихорадкой, интоксикацией, а также поражением лимфоузлов (лимфоаденопатией), нёбных и глоточных миндалин. Нередко увеличивается печень, селезёнка, появляются петехии на слизистой верхнего нёба. В ряде случаев инфекционный мононуклеоз осложняется гепатитом, пневмонией, гемолитической анемией, тромбоцитопенией, апластической анемией, разрывом селезёнки, а также кардиологическими (миокардит) и неврологическими нарушениями (синдром Гийена-Барре, энцефалит, менингит). В редких случаях развивается хроническая активная инфекция, при которой симптомы заболевания сохраняются на протяжении более чем 6 месяцев после первичного инфицирования вирусом Эпштейна — Барр, а также имеются гистологические признаки поражения внутренних органов (пневмонит, гепатит, гипоплазия костного мозга, увеит) и выявляются антигены или ДНК вируса в тканях. Кроме того, при этом состоянии часто выявляются очень высокие титры вирус-специфических антител. И, напротив, при синдроме хронической усталости титр антител к вирусу Эпштейна — Барр или другим вирусам лишь немного повышен.
Вирус Эпштейна — Барр инфицирует свыше 90 % здоровой популяции и сохраняется в небольших количествах в В-клетках памяти. Соответственно, около 90 % взрослых людей являются вирусоносителями. Вирус сохраняется в В-лимфоцитах и клетках эпителия на протяжении всей жизни и при снижении иммунитета (например, при ВИЧ-инфекции или иммуносупрессивной терапии) может способствовать развитию лимфопролиферативных заболеваний, назофарингеальной карциномы или — наиболее часто — инфекционного мононуклеоза.
Определение антител IgM и IgG к отдельным белкам позволяет более точно определять фазу течения инфекции, учитывая высокую частоту персистенции вируса. Иммуноблотинг для определения антител класса IgM и IgG к отдельным белкам дает дополнительную информацию о фазе течения инфекции. Выявление белка VСА 125 указывает на раннюю фазу течения инфекции. В период разгара течения инфекции и на этапе завершения острого процесса появляются VСА 19. О поздней фазе течения инфекции свидетельствует обнаружение высокоспецифичного маркера VСА 22, который выявляется одиночно или совместно с EBNA-1 (р79). Последний белок длительно присутствует у лиц, переболевших инфекцией, и убедительно свидетельствует о перенесенной инфекции. Отмечается частое присутствие IgM-р45 и IgM-p79 при активном процессе, IgM-p43 и IgG-p27 коррелирует с тяжестью течения инфекции, а выявление IgM-p65, IgM-p33 — с наличием гепато- и спленомегалии.
Данное исследование обладает высокой специфичностью (98 %) и чувствительностью (95%) метода, позволяет провести определение антител к отдельным антигенам вируса, полного спектра выявляемых клинически значимых антигенов, подтвердить результаты скрининга, провести дифференциальную диагностику между острой и прошедшей инфекцией.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики инфекционного мононуклеоза и оценки стадии инфекции.
- Для дифференциальной диагностики герпетических инфекций.
- Для дифференциальной диагностики при ангинах и тонзиллитах.
- Для выявления реактивации вируса Эпштейна — Барр при трансплантации органов и тканей.
Когда назначается исследование?
- При клинических (гепатоспленомегалия, тонзиллофарингит, припухлость околочелюстных и шейных лимфатических узлов) и лабораторных (атипичные лимфоциты в периферической крови) признаках инфекционного мононуклеоза.
- При сомнительных результатах ИФА-теста, а также в дополнение и для подтверждения результатов.
- При ВИЧ-инфекции.
- При проведении иммуносупрессивной терапии после трансплантации органов или костного мозга.
Что означают результаты?
Референсные значения
Компонент | Референсные значения |
Антиген VCA p125 | Не обнаружено |
Антиген VCA p19 | Не обнаружено |
Антиген EBNA-1 | Не обнаружено |
Антиген p22 | Не обнаружено |
Антиген EA-D | Не обнаружено |
Острая (первичная) инфекция:
- обнаружены антитела класса IgG и IgM к антигенам VCA;
- наличие IgM-антител к EBNA-1 также может указывать на первичную инфекцию.
Поздняя фаза инфекции:
- обнаружены антитела класса IgG к антигенам VCA (в особенности к антигену VCA р22, который является маркером поздней фазы EBV-инфекции);
- обнаружены антитела к EBNA-1.
Поздняя инфекция с отсутствием антител к EBNA-1:
- антитела к EBNA-1 отсутствуют, но присутствуют антитела к р22 в тестах на IgG-антитела;
- как правило, отсутствуют антитела к VCA в тестах на IgM-антитела;
- могут присутствовать антитела класса IgG к антигену EA-D.
Реактивация:
- обнаружены IgG-антитела к антигену ЕА.
Реактивацию отличают от свежей фазы инфекции по четко низкой распространенности IgM-антител к VCA и по присутствию антител класса IgG к EBNA-1 и/или к VCA p22.
Характеристика антигенов EBV:
VCA (капсидный вирусный антиген) | EA (ранний антиген) | EBNA (ядерный антиген ЕВ) |
p125, p65, p42, p41, p40, p33, p22 | EA-R p93, EA-D p45, EA-D p43 | EBNA-1 p79 |
Интерпретация результатов по статусу инфекции:
Статус инфекции | Anti-VCA (IgG) | Anti-VCA (IgM) | Anti-EBNA-1 (IgG) | Anti-p22 (IgG) | Anti-EA-D (IgG) |
Отсутствие | — | — | — | — | — |
Острая инфекция | + | + | — | — | +/- |
Поздняя фаза | + | — | + | + | — |
Реактивация | + | +/- | + | + | + |
Важные замечания
- Отрицательный результат теста не исключает острую инфекцию. При подозрении и клинических симптомах исследование рекомендовано повторить через 8 дней.
- Для выяснения статуса EBV-инфекции в случае иммуносупрессии у пациентов или у лиц с ослабленной иммунной системой рекомендуется определение вирусной нагрузки, так как серологические тесты часто несопоставимы с результатами прямых тестов.
Также рекомендуется
- Epstein Barr Virus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgM
- Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG
- Epstein Barr Virus ядерный антиген (EBNA), IgG (количественно)
- Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
- Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
Кто назначает исследование?
Инфекционист, педиатр, ЛОР, гематолог, терапевт, врач общей практики.
Литература
- Cohen J.I. Epstein-Barr virus infection / J.I. Cohen // N. Engl. J. Med. — 2000. — Vol. 343, N 7. — P. 481-492.
- Hess R.D. Routine Epstein-Barr virus diagnostics from the laboratory perspective: still challenging after 35 years / R.D.Hess // J. Clin. Microbiol. — 2004. — Vol. 42, N 8. — P. 3381-3387.
- Johannsen E.C., Schooley R.T., Kaye K.M. Epstein-Barr Virus (Infectious Mononucleosis). In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. — Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. — 2701 p.
- Мустафин Р. И., Буховец А. В., Протасова А. А., Шайхрамова Р. Н., Ситенков А. Ю., Семина И. И. Сравнительное исследование поликомплексных систем для гастроретентивной доставки метформина. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2015; 1(10): 48–50.
- ОФС.1.2.1.1.0003.15 Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях // Государственная фармакопея, XIII изд.
- Debjit B., Rishab B., Darsh G., Parshuram R., Sampath K. P. K. Gastroretentive drug delivery systems- a novel approaches of control drug delivery systems. Research Journal of Science and Technology;10(2): 145–156. DOI: 10.5958/2349-2988.2018.00022.0.
- https://www.invitro.ru/library/bolezni/24814/.
- https://helix.ru/kb/item/07-176.
- Moustafine R. I., Bukhovets A. V., Sitenkov A. Y., Kemenova V. A., Rombaut P., Van den Mooter G. Eudragit® E PO as a complementary material for designing oral drug delivery systems with controlled release properties: comparative evaluation of new interpolyelectrolyte complexes with countercharged Eudragit® L 100 copolymers. Molecular Pharmaceutics. 2013; 10(7): 2630–2641. DOI: 10.1021/mp4000635.
- Харенко Е. А., Ларионова Н. И., Демина Н. Б. Мукоадгезивные лекарственные формы. Химико-фармацевтический журнал. 2009; 43(4): 21–29. DOI: 10.30906/0023-1134-2009-43-4-21-29.