Анализ крови на микрореакцию — что это такое? Микрореакция крови, или реакция преципитации, является наиболее достоверным методом исследования крови больного для проведения детальной и глубокой диагностики такого заболевания, как сифилис.
Проводят его для окончательного выявления специфических при данном заболевании антител. Они представляют собой уникальные белки, которые синтезирует иммунная система. Выделить такие вещества можно лишь в случае образования в организме необходимых антигенов. В свою очередь, антигены представляют собой липидные вещества, образовавшиеся из клеточных мембран, которые ранее были разрушены возбудителем любой стадии сифилиса, а именно бледной трепонемой. Это хорошая и качественная методика. Она отличается особой простотой при проведении реакций, быстротой результата и дешевизной.
Основные виды анализа
Микрореакция относится скорее к неспецифическим видам анализов, то есть не направленным на выявление самого возбудителя. Дело в том, что она способна выявить даже самые мелкие повреждения клеточных мембран, которые и будут свидетельствовать о наличии трепонемы в организме.
Существует несколько основных видов реакции микропреципитации:
- Тест с микроскопией позволяет выявить все липидные включения при помощи светового микроскопа без дополнительных веществ.
- Тест с макроскопией еще можно назвать экспресс-диагностикой развивающегося сифилиса. Основывается метод на выявлении комплекса антиген-антитело. Результат можно получить без использования специальной аппаратуры. Чтобы увидеть реакцию к полученному комплексу, просто добавляют любое химическое вещество, которое, прочно соединяясь с данным комплексом, окрашивает его.
- Тест с определенным количественным показателем. Этот тест проводится путем неоднократного разведения всего исследуемого материала, чтобы определить точное количество выявленных комплексов антиген-антитело в каждом случае.
Показания к проведению анализа
Такие исследования чаще всего проводят, чтобы выявить возбудителя сифилиса у большой группы населения. Основная цель такого анализа — это массовость, которая необходима для дальнейшей диагностики, если будет получен положительный результат.
Обычно анализ крови на микрореакцию назначается:
- в местах лишения свободы;
- при поступлении в стационар;
- беременным женщинам;
- перед оперативным вмешательством;
- военнослужащим;
- в период прохождения профилактических осмотров по месту работы;
- донорам крови.
Этот метод быстрой диагностики также широко применяют для окончательного контроля после лечения заболевания. Ведь именно реакция микропреципитации является одним из наиболее достоверных методов.
Методика проведения анализа и оценка результатов
Чтобы правильно провести такое исследование, сначала делают забор крови из пальца. Следующим анализом будет забор венозной крови из большой локтевой или другой крупной вены, который делается натощак. В случае если кровь из вены собрать невозможно, для анализа берут спинномозговую жидкость. Реакцию необходимо проводить на стерильном и обезжиренном сухом стекле. На него сразу помещается антиген, небольшая капля плазмы или сыворотка. После этого к заранее перемешанным первичным реагентам добавляют краситель. Чаще всего это могут быть небольшие кусочки угля. Обычно при проведении макроскопии всегда следят за изменением окраски препарата.
Результаты реакции могут быть следующими:
- Положительная реакция. Если в препарате будут обнаружены антитела к липидным образованиям разрушенных ранее клеточных мембран, то появится специфический осадок с наличием в нем небольших хлопьев. Такой результат может свидетельствовать о наличии в организме какой-либо из форм сифилиса, а также о частичном сохранении основного титра заболевания у небольшой группы зараженных вирусом людей уже после лечения.
- Отрицательная реакция говорит об отсутствии в крови специфических для заболевания иммунных белков. При этом никаких хлопьев в осадке обнаружено не будет. Это может означать, что сифилис не выявлен или находится уже на одной из поздних стадий. Может быть и такой вариант, когда обследование проводится на ранних этапах развития заболевания, когда антитела еще не успели образоваться или их общее количество очень мало. Такая реакция характеризуется незначительным, почти незаметным выпадением специфического осадка, что, в свою очередь, говорит о наличии малого количества антилипидных антител. В таких случаях назначают повторные анализы, советуют постоянное наблюдение у специалистов и проведение дополнительных методов обследования.
Обычно при проведении реакции микропреципитации обнаружить иммунные комплексы возможно лишь через месяц после заражения.
При развитии болезни количество антител будет только расти. Однако следует хорошо изучать все результаты проведенных исследований, поскольку на более поздних стадиях заболевания или при его скрытой форме основной титр антител может быть низким, поэтому реакция может оказаться отрицательной.
Ложные результаты анализа
Бывают случаи, когда анализ крови может показать недостоверные или ложные результаты. Такое может произойти, если была нарушена технология проведения теста. Ошибочный результат возможно получить при неправильном заборе исследуемого материала. Неправильное перемешивание ингредиентов, их загрязнение, нарушение технологии хранения — все это может привести к ошибочному результату.
Положительные ложные результаты также могут проявляться, например, при наличии в организме патологических состояний. Поэтому необходимо (до постановки окончательного диагноза) провести дополнительные исследования для выявления возможных патологий. Ложные положительные результаты могут быть при:
- беременности;
- наличии новообразований;
- сахарном диабете;
- вирусных заболеваниях печени;
- воспалении обоих легких или туберкулезе;
- при подагре;
- аутоиммунной и другой патологии любого генеза;
- алкоголизме и наркотической зависимости.
Таким образом, анализ крови на микрореакцию позволяет вовремя выявить заболевание и начать лечение.
Микрореакция на сифилис
Микрореакция на сифилис — лабораторное исследование, выполняемое с целью подтверждения или исключения присутствия в крови антител к бледной трепонеме. Такой анализ называют реакцией микропреципитации (МР), реакцией быстрых плазменных реагинов (RPR).
Существует разновидность такой реакции — ее называют микроскопическим исследованием VRDL, выполняемым с помощью световой микроскопии.
Реакцией микропреципитации это исследование называют потому, как при положительном ее результате происходит выпадение в осадок (преципитация) хлопьев (это и есть комплекс «антиген-антитело»).
Как проводится
Микрореакция на сифилис проводится путем анализа сыворотки крови.
Исследование основано на связывании специфического комплекса «антиген-антитело».
В роли антигена в данном случае выступает кардиолипиновый антиген, антител — липопротеины разрушающихся под действием бледных трепонем тканей организма и, возможно, компоненты клеточной оболочки возбудителя.
Следует иметь в виду, что микрореакция на сифилис не может использоваться с целью подтверждения болезни. Это исследование является лишь отборочным, так как разрушением тканей сопровождается не только сифилис.
Также и целый ряд других заболеваний (системные коллагенозы, туберкулез и т.д.).
Поэтому положительная микрореакция на сифилис может наблюдаться, в том числе, и в этих случаях. Такой результат исследования не может являться подтверждением наличия сифилитической инфекции. Он лишь служит сигналом для проведения дополнительных уточняющих анализов.
Положительная реакция
МР — серологическое исследование, используемое с целью массового скрининга населения на сифилис. Его проводят при постановке на учет по беременности, в ходе медосмотров работников здравоохранения, образования, общественного питания.
Также перед стационарным лечением и операцией, у доноров крови и трансплантируемых органов.
Кроме того, МР незаменима для быстрой диагностики сифилиса у людей, близко контактирующих с сифилитическими больными.
Также у тех, чей половой партнер заражен сифилисом.
Реакцию микропреципитации проводят у всех пациентов с язвенными, эрозивными, папулезными высыпаниями на половых органах.
Необходим такой анализ и с целью контроля зараженности после незащищенных половых контактов со случайными партнерами. Это неспецифический, нетрепонемный тест, поэтому подходит он лишь для первоначальной, экспресс-диагностики инфекции.
При положительном результате проводятся специфические трепонемные серореакции (ИФА, РПГА).
Позволяющие точно верифицировать диагноз и подтвердить заболевание.
Микрореакция на сифилис позволяет диагностировать не только качественно (на присутствие антител к трепонеме), но и количественно — определять титр антител и интенсивность течения заболевания.
Отрицательная реакция
Отрицательная микрореакция на сифилис означает, что в крови пациента отсутствуют антитела к бледной трепонеме и заболевания нет.
МР — исследование, которое используют с целью оценки эффективности лечения сифилиса.
По окончании курса специфической медикаментозной терапии проводится микрореакция.
При ее отрицательном результате делается вывод об успешности и эффективности терапии.
При положительном — терапия продолжается, возможно, меняется ее тактика и выбор препаратов.
Использовать специфические трепонемные тесты для контроля излеченности сифилисом нецелесообразно.
Так как они могут оставаться положительными на протяжении всей жизни пациентов, даже при их давнем выздоровлении.
Сдавать кровь на МР следует утром натощак, кровь берут из вены.
За день до этого следует воздержаться от употребления алкоголя, жирной, жареной и тяжелой пищи.
Если вы хотите провести анализ микрореакция на сифилис — обращайтесь в нашу клинику.
Поставьте оценку статье:
Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр
[07-056] Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр
380 руб.
Тест выявляет антитела против кардиолипина (липида, который входит в состав мембраны митохондрий и бактерий). Эти антитела присутствуют в крови у больных сифилисом.
Синонимы русские
Неспецифический антифосфолипидный (реагиновый) тест, современный аналог реакции Вассермана (RW).
Синонимы английские
Nontreponemal test, rapid plasma reagin test, syphilis screening test, STS.
Метод исследования
Флокуляционный тест.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Возбудителем сифилиса является Treponema pallidum (бледная трепонема), бактерия из семейства спирохет.
Сифилис — венерическое заболевание: наиболее часто он передается половым путем. Кроме того, возможно заражение через кровь (например, при совместном использовании шприцев, бритв и пр.), плода от матери или бытовым путем (очень редко).
В международной классификации болезней выделяют врождённый, ранний и поздний сифилис, а также неуточненные формы. В медицинской литературе используются понятия первичный, вторичный и третичный сифилис.
Инкубационный период начинается с момента заражения и длится до первых симптомов (твердого шанкра) в среднем 21 день (от 10 до 90 дней).
Первичный сифилис — стадия с возникновения твердого шанкра до появления сыпи. Твердый шанкр — это язвочка, которая может появляться в том месте, где возбудитель проник в организм (обычно на половых органах). Он не болит и исчезает (без лечения) через 2-6 недель. Также на этой же стадии иногда увеличиваются лимфоузлы. В первое время заболевший человек остается серонегативным (т. е. в его крови еще нет антител против сифилиса).
Вторичный сифилис. Примерно через 4-8 недель после появления шанкра проявляются новые симптомы: сыпь и общее недомогание, температура, головная боль и др. Возможны и более тяжелые проявления.
Затем признаки сифилиса исчезают и заболевание переходит в латентную фазу. При этом возбудитель все же не покидает организм, поэтому при ослаблении иммунитета могут возникать рецидивы болезни. Их симптомы совпадают с проявлениями вторичного сифилиса.
Бывает, что сифилис так и остается в латентной форме. Но в ряде случаев, если человек не лечится, с годами развивается третичный сифилис. При этом поражаются различные органы и ткани: нервная и сердечно-сосудистая система, кости, суставы и др.
Для диагностики сифилиса часто используют серологические тесты (основанные на выявлении антител). Все виды анализов можно разделить на две группы: трепонемные и нетрепонемные тесты. Анализ на сифилис RPR относится к нетрепонемным.
Трепонемные тесты выявляют антитела, направленные конкретно против самих бактерий T. Pallidum, например сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации) или сифилис РИФ (реакция иммунофлуоресценции).
Посредством нетрепонемных тестов выявляют антитела против кардиолипина (липида, который входит в состав мембраны митохондрий и бактерий). Они появляются в организме человека со стадии первичного сифилиса (примерно через неделю после возникновения твердого шанкра). При нетрепонемных методах анализа на сифилис не различают тип антител (IgG, IgM или др.), а определяют суммарный ответ. К таким исследованиям относят микрореакции преципитации: RPR, VDRL и др.
При первичном и вторичном сифилисе чувствительность нетрепонемных тестов высокая (в случае RPR: 86 % при первичном, 100 % при вторичном), а чем выше чувствительность метода, тем больше вероятность, что тест выявит болезнь. Соответственно, если человек болен сифилисом, то результат теста со 100-процентной чувствительностью точно будет положительным.
Однако при использовании нетрепонемных тестов возможен и ложноположительный результат (выявление антител, несмотря на то что человек не болен сифилисом). Дело в том, что антитела против кардиолипина возникают не только при сифилисе, но и при некоторых других заболеваниях.
Поэтому при диагностике сифилиса нетрепонемный тест должен быть подтвержден с помощью более специфичного трепонемного.
У нетрепонемных тестов есть еще одна особенность. Антитела против кардиолипина появляются в острой фазе болезни. Поэтому, когда человек выздоравливает, их уровень снижается, так что по нему можно судить об успешности лечения.
Для чего используется исследование?
- Для первичной диагностики сифилиса.
- Чтобы оценить успешность лечения.
Когда назначается исследование?
- При скрининговом обследовании на сифилис. Обследоваться должны беременные женщины, доноры крови (и органов), представители некоторых профессий (врачи, работники сферы питания, люди, контактирующие с детьми, пациенты перед госпитализацией или хирургической операцией.
- При подозрении на сифилис (если у пациента есть симптомы сифилиса, генитальные язвы или другие половые инфекции, а также если его половой партнер болен сифилисом). В частности, когда ребенок родился от матери, больной сифилисом.
- После прохождения курса лечения от сифилиса.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Отрицательный результат
- Сифилиса нет. Однако нельзя полностью исключить и другие варианты.
- Сифилис на ранней стадии. Если с момента заражения прошло меньше 3-5 недель, то антитела против кардиолипина еще не детектируются. Тест следует повторить через 10-14 дней.
- Сифилис на поздней стадии. После стадии вторичного сифилиса количество кардиолипиновых антител снижается. Например, чувствительность метода VDLR при третичном сифилисе составляет 70 % (т. е. у 30 % больных результат будет отрицательным).
- Ложноотрицательный результат (в редких случаях). Существует «эффект прозоны»: если антител очень много (слишком высокий титр), то результат может оказаться отрицательным.
Окончательное решение о постановке диагноза зависит от результата других тестов (трепонемных).
Положительный результат
- Сифилис.
- Ложноположительный результат. В этом случае титр антител обычно очень низкий.
Положительный результат должен быть подтвержден с помощью специфических трепонемных тестов.
Что означают результаты теста, который сдают повторно (после курса лечения)?
- Если результат стал отрицательным или титр снизился в 4 раза и более — лечение прошло успешно.
- Если титр не снизился — нужна консультация с врачом и дальнейшие исследования.
Что может влиять на результат?
Ложноположительные результаты могут быть:
- при аутоиммунных расстройствах (например, при системной красной волчанке, тиреоидите),
- при лепре, ВИЧ-инфекции, атипичной пневмонии, малярии и др.,
- у людей, употребляющих наркотики внутривенно,
- у пожилых.
Также рекомендуется
- Сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), титр
- Treponema pallidum, антитела
- Treponema pallidum, ДНК [ПЦР]
- Treponema pallidum, IgG, титр
- Treponema pallidum, IgM, титр
- Treponema pallidum, IgG в ликворе
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, терапевт, инфекционист, венеролог.
Литература
- Марданлы С. Г., Дмитриев Г. А. Лабораторная диагностика сифилиса (информационно-методическое пособие. М., 2009.
- Goldman’s Cecil Medicine. 24th ed. Goldman L, Schafer A.I., eds. Saunders Elsevier; 2011.
Микрореакция
Описание
Отборочный метод исследования крови для диагностики сифилиса называют микрореакцией преципитации. Он проводится для выявления в крови антител, которые представляют собой специфические белки, синтезируемые иммунной системой. Эти вещества выделяются при образовании в организме антигенов — липидных веществ из клеточных мембран, разрушенных бледной трепонемой (возбудитель сифилиса). Методика отличается простотой в использовании, быстротой проведения и низкими финансовыми затратами.
Микрореакция относится к неспецифическим (нетрепонемным) методам исследования, потому что выявляет не возбудитель, а повреждение клеток. Их разрушение может возникать при других патологиях в организме. При положительном результате анализа назначают специфические серологические тесты, такие как ИФА (иммуноферментный анализ), РПГА (реакция прямой гемагглютинации), РИФ (реакция иммунофлюоресценции). Они позволяют напрямую выявлять содержание возбудителя сифилиса.
Показания к проведению анализа
Исследование проводят для выявления возбудителей сифилиса среди больших групп населения. Главной целью анализа является массовость проведения скринингового теста для последующей диагностики в случае положительных результатов.
Кровь на микрореакцию назначают:
- при госпитализации в стационар;
- заключенным в местах лишения свободы;
- перед проведением оперативного вмешательства;
- беременным женщинам;
- лицам, проходящим военную службу;
- во время проведения медицинских осмотров работникам образования, медицины, общепита;
- донорам крови или органов.
Методика проведения и оценка результатов
Для исследования делают забор капиллярной крови из пальца, венозной крови из локтевой вены натощак или получают спинномозговую жидкость. Анализ проводят на стерильном обезжиренном стекле, куда помещают классический реагент (антиген), каплю сыворотки или плазмы. После тщательного перемешивания ингредиентов и добавления частиц угля при макроскопии следят за результатами реакции.
Сыворотку крови и лабораторный антиген смешивают на стерильной чашке Петри
- Положительная реакция. Характеризуется образованием хлопьев в осадке при обнаружении антител к липидам разрушенных клеточных мембран. Она свидетельствует о заболевании любой формой сифилиса, а также о сохранении титра у небольшой группы людей после лечения болезни.
- Отрицательная реакция. Характеризуется отсутствием образования характерных хлопьев, кровь не содержит специфических белков. Это означает, что сифилис не выявлен, либо находится на поздней стадии. В некоторых случаях обследование проводят на ранних этапах первичной формы болезни, когда антитела еще не образовались или их количество ничтожно мало.
- Сомнительная реакция. Выявляется незначительное выпадение осадка, что свидетельствует о низком содержании антилипидных антител. В таких случаях необходимо наблюдение, повторные анализы, назначение дополнительных методов обследования.
Возможность обнаружения иммунных комплексов при помощи микрореакции преципитации наступает через месяц после заражения. В процессе развития болезни концентрация антител нарастает. При скрытой форме и позднем сифилисе титр может быть невысоким, а иногда давать отрицательные реакции.
Ложные результаты анализа
В некоторых случаях кровь при обследовании дает ложные результаты. На это может влиять нарушение техники проведения теста. Некачественный забор исследуемого материала и его неправильное хранение, недостаточное перемешивание или загрязнение часто вызывают ошибочные реакции.
Ложноположительные результаты возникают при различных патологических и физиологических состояниях в организме. Поэтому весомое значение для верной трактовки микрореакции имеет выявление этих факторов. Ложноположительные результаты вызывают:
- вынашивание плода;
- новообразования;
- вирусные повреждения печени;
- сахарный диабет;
- воспаление легких, туберкулез;
- аутоиммунная патология;
- подагра;
- злоупотребление алкогольными напитками;
- наркотическая зависимость.
Ложноотрицательные результаты микрореакции образуются при высоком содержании иммунных комплексов в крови либо в первые недели заболевания при ничтожно малом количестве антител. В сомнительных случаях назначается консультация венеролога для осмотра кожных покровов и слизистых оболочек, проведение специфических серологических анализов.
- Мустафин Р. И., Буховец А. В., Протасова А. А., Шайхрамова Р. Н., Ситенков А. Ю., Семина И. И. Сравнительное исследование поликомплексных систем для гастроретентивной доставки метформина. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2015; 1(10): 48–50.
- Sprengel, «Pragmatische Geschichte der Heilkunde».
- Patil H., Tiwari R. V., Repka M. A. Recent advancements in mucoadhesive floating drug delivery systems: A mini-review. Journal of Drug Delivery Science and Technology. 2016; 31: 65–71.DOI: 10.1016/j.jddst.2015.12.002.
- https://eurodent-st.ru/zabolevaniya/analizy/analiz-krovi-na-mikroreakciyu-chto-eto-takoe.
- https://venerologiya.moscow/content/mikroreakciya-na-sifilis.
- https://helix.ru/kb/item/07-056.
- https://mc-professor.ru/gematol/%D0%BC%D0%B8%D0%BA%D1%80%D0%BE%D1%80%D0%B5%D0%B0%D0%BA%D1%86%D0%B8%D1%8F-detail.html.
- ОФС.1.2.1.1.0003.15 Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях // Государственная фармакопея, XIII изд.
- Debjit B., Rishab B., Darsh G., Parshuram R., Sampath K. P. K. Gastroretentive drug delivery systems- a novel approaches of control drug delivery systems. Research Journal of Science and Technology;10(2): 145–156. DOI: 10.5958/2349-2988.2018.00022.0.