Helicobacter pylori, IgG (количественно)

Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

[09-053] Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

580 руб.

Выявление Helicobacter pylori (H. pylori), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма в образце биоматериала.

Синонимы русские

Хеликобактер [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени].

Синонимы английские

H. pylori, Helicobacter pyloridis, DNA [real- polymerase chain reaction, RT-PCR, quantitative RT-PCR, qPCR, qRT-PCR].

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Биоптат, кал.

Общая информация об исследовании

H. pylori — это грамотрицательная подвижная бактерия, устойчивая к воздействию соляной кислоты и способная колонизировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Как правило, первичное инфицирование происходит в детстве и протекает бессимптомно, но у некоторых людей с течением времени приводит к развитию серьезных заболеваний. H. pylori обнаруживается в подавляющем большинстве случаев гастрита и язвенной болезни и, кроме того, многократно увеличивает риск развития аденокарциномы и В-клеточной лимфомы желудка. Современная диагностика этих заболеваний невозможна без точной и быстрой идентификации H. pylori.

H. pylori может быть выявлена с помощью нескольких методов. В настоящее время доступны неинвазивные методы диагностики, обладающие преимуществом простоты и безопасности взятия образца для исследования (исследование кала), что имеет особое значение при обследовании пожилых людей, детей, а также в условиях амбулатории.

Helicobacter очень чувствительна к воздействию желчных кислот и пониженного содержания кислорода, поэтому при пассаже химуса через двенадцатиперстную и толстую кишку количество бактерий значительно снижается. Кроме того, активные спиралевидные формы бактерии претерпевают морфологические изменения, обеспечивающие большую устойчивость в неблагоприятных условиях. Результатом этого становится низкая концентрация микроорганизмов и преобладание кокковых форм в кале, что следует учитывать при выборе лабораторного метода исследования этого биоматериала. Среди многих неинвазивных методов особое место занимает исследование с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Полимеразная цепная реакция в реальном времени (РТ-ПЦР) — это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в кале) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. РТ-ПЦР характеризуется очень высокой чувствительностью (93-95 %), что является преимуществом при анализе кала. В отличие от бактериологического посева, это исследование позволяет выявлять как спиралевидные, так и кокковые (некультивируемые) формы H. pylori. Из-за того что в реакции выявляется ДНК микроорганизма, исследование не применяется для дифференциальной диагностики текущей инфекции или инфекции в анамнезе — результат анализа будет положительным еще некоторое время после полной эрадикации H. pylori, что обусловлено выявлением фрагментов разрушенных ДНК микроорганизма.

На слизистой оболочке желудка могут также присутствовать другие представители рода Helicobacter (H. suis, H. baculiformis). Несмотря на то что их значение в развитии заболеваний ЖКТ еще до конца не установлено, они играют определенную роль при идентификации H. pylori. Так, например, лабораторные исследования, основанные на выявлении общего для всех видов Helicobacter антигена, будут характеризоваться большим числом ложноположительных результатов исследования на H. pylori за счет выявления других видов (как в случае с ELISA). Это практически исключено в исследовании с помощью РТ-ПЦР, так как реакция основана на выявлении специфического для H. pylori фрагмента ДНК.

Диагностика хеликобактериоза у детей представляет определенные трудности. Это связано с невыполнением ребенком дыхательного маневра при использовании уреазного дыхательного теста, а также необходимостью наркоза при использовании инвазивных методов. Исследование кала с помощью РТ-ПЦР является хорошей альтернативой этим методам и поэтому может быть с успехом применено в педиатрической практике.

Высокое содержание неорганических солей (фосфатов, кальция), ферментов ЖКТ, полисахаридов, желчных кислот и солей, растительных волокон, слизи и других компонентов кала может ингибировать РТ-ПЦР, поэтому подготовка к тесту требует должного внимания со стороны пациента и врача. Интерпретация результата анализа проводится с учетом дополнительных лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для диагностики заболеваний, вызванных H. pylori:

• атрофического или антрального гастрита;
• язвы желудка и двенадцатиперстной кишки.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на гастрит или язвенную болезнь у детей и пожилых людей.
• При невозможности использования инвазивных методов идентификации H. pylori у пациентов любого возраста.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат:

• текущая H. pylori-инфекция;
• H. pylori-инфекция в анамнезе.

Отрицательный результат:

• отсутствие H. pylori-инфекции.

Что может влиять на результат?

• Присутствие в образце кала крови, желчи, избытка неорганических солей и других компонентов может приводить к получению ложноотрицательного результата.
• Лечение препаратами тетрациклина, пенициллина (аминопенициллины), макролидами (кларитромицин, азитромицин) и метронидазолом может приводить к получению ложноотрицательного результата.

Важные замечания

• Исследование не позволяет дифференцировать текущую H. pylori-инфекцию и инфекцию в анамнезе.

Также рекомендуется

• Helicobacter pylori, IgA (количественно)
• Helicobacter pylori, IgG (количественно)
• Helicobacter pylori, антиген
• Гастрин
• Пепсиноген I
• Пепсиноген II
• Антитела к париетальным (обкладочным) клеткам желудка
• Лабораторное обследование — гастрит и язвенная болезнь желудка
• Лабораторная диагностика и мониторинг атрофического гастрита и язвенной болезни
• Анализ кала на скрытую кровь
• Копрограмма

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, педиатр, врач общей практики.

Литература

• Tahereh Falsafi, Raha Favaedi, Fatemeh Mahjoub, and Mehri Najafi. Application of S-PCR test for diagnosis of Helicobacter pylori infection in children.
• Kabir S. Detection of Helicobacter pylori DNA in feces and saliva by polymerase chain reaction: a review. Helicobacter. 2004 Apr;9(2):115-23. Review.
• Sen N, Yilmaz O, Simsek I, Küpelioglu AA, Ellidokuz H. Detection of Helicobacter pylori DNA by a simple s PCR method in adult dyspeptic patients. Helicobacter. 2005 Aug;10(4):353-9.
• Monteiro L, Gras N, Vidal R, Cabrita J, Mégraud F. Detection of Helicobacter pylori DNA in human feces by PCR: DNA stability and removal ofinhibitors. J Microbiol Methods. 2001 Jun;45(2):89-94.

Helicobacter pylori, IgM

[07-141] Helicobacter pylori, IgM

930 руб.

Определение титров специфических антител к H. pylori в целях дифференциальной диагностики и подтверждения остроты инфекционного процесса.

Синонимы русские

Хеликобактер пилори, иммуноглобулины М.

Синонимы английские

Helicobacter pylori, IgM.

Метод исследования

Иммуноанализ.

Единицы измерения

Ед/мл (единица на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозная кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Helicobacter pylori, обнаруженная в 1982 году, является наиболее часто встречающейся хронической бактериальной инфекцией в развивающихся странах (распространенность до 90 %, в развитых странах — менее 40 %). За последние три десятилетия лечении инфекции Helicobacter pylori привело к сдвигу парадигмы в клинической медицине с огромным влиянием на повседневную практику. Данная инфекция признается основным патогенным фактором при язвенной болезни и хронических гастритах, помимо этого, она является основным фактором риска развития рака желудка у этих пациентов. Также наличие Helicobacter pylori повышает риск развития рака толстой кишки, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры, железодефицитной анемии, дефицита витамина В12, нейродегенеративных расстройств и метаболического синдрома.

Предполагается, что заражение Helicobacter pylori происходит в основном в детском возрасте и остается пожизненно (если не будет произведена эрадикация). Также предполагается, что инфицирование напрямую связано с гигиеной, санитарными условиями населения, социально-экономическими факторами, так, в развивающихся странах доля инфицированных детей достигает 90 % и более, тогда как в развитых странах — 1,2-12,2 %.

Инфицирование Helicobacter pylori определяется несколькими способами: неинвазивными (определение титра антител к антигенам Helicobacter pylori, уреазный дыхательный тест) и инвазивными (при фиброгастродуоденоскопии проводится биопсия тканей, образец которой подвергается на тест наличия уреазы, антигенов Helicobacter pylori, гистологическому и культуральному исследованиям).

Антитела IgM к Helicobacter pylori определяются через несколько дней после начала заболевания, достигают пика в промежутке 1-4 недель, а затем снижаются. Стоит отметить, что наличие антител IgM говорит о наличии острого инфекционного процесса, однако их низкие значения — это еще не признак отсутствия заболевания, а возможно, признак хронического воспаления. Для более точной диагностики используют комплексный анализ на иммуноглобулины M, G и A.

Для чего используется исследование?

• Для выявления возбудителя и определения стадии специфического инфекционного процесса.

Когда назначается исследование?

• При наличии клиники поражения ЖКТ (боли в эпигастральной области, диспепсические расстройства и т.д.).
• При определении стадии специфического инфекционного процесса.

Что означают результаты?

Референсные значения

Результат: отрицательный.

Концентрация:

Появление IgМ — показатель раннего инфицирования (5-7-е сутки), сохраняются в течение 1-1,5 недель. Их наличие может говорить о ранней острой инфекции и о выраженном воспалительном процессе на слизистой.

Что может влиять на результат?

• Иммунный статус людей, получающих иммуносупрессивную терапию или имеющих синдром иммунодепрессии другой этиологии.

Важные замечания

• Рекомендовано исследовать IgM совместно с IgG и IgA.

Также рекомендуется

• Комплексная диагностика Helicobacter pylori
• Серологическая диагностика Helicobacter pylori
• Helicobacter pylori, IgA (количественно)
• Helicobacter pylori, IgG (количественно)

Кто назначает исследование?

Врач-терапевт, врач общей практики, гастроэнтеролог, хирург.

Литература

• Ozbey G, Hanafiah A. Epidemiology, Diagnosis, and Risk Factors of Helicobacter pylori Infection in Children. / Euroasian J Hepatogastroenterol. 2017 Jan-Jun;7(1):34-39.
• Peter Nagy, Saga Johansson, Michael Molloy-Bland. Systematic review of trends in the prevalence of Helicobacter pylori infection in China and the USA. / Gut Pathog. 2016; 8: 8.
• Selgrad M, Malfertheiner P. Management of Helicobacter pylori Infection: What Should the Surgeon Know? / Visc Med. 2017 Jun;33(3):216-219.

Комплексная диагностика Helicobacter pylori

[40-158] Комплексная диагностика Helicobacter pylori

1920 руб.

Комплексный анализ, предназначенный для выявления H. pylori у пациентов с подозрением на гастрит, язву желудка или двенадцатиперстной кишки, включающий основные серологические тесты и метод РТ-ПЦР.

Синонимы русские

Комплексная диагностика геликобактериоза.

Синонимы английские

H. pylori diagnostic panel, H. pylori Abs, IgA, IgG, H. pylori, PCR.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, кал.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
• Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

H. pylori — это грамотрицательный, факультативно-анаэробный микроорганизм, способный инфицировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. В большинстве случаев инфицирование H. pylori (геликобактериоз, или хеликобактериоз) носит постоянный, хронический характер. Геликобактериоз очень распространен: бактерия H. pylori может быть выявлена у 50 % людей земного шара. При этом H. pylori-ассоциированные заболевания (гастрит, язва желудка или двенадцатиперстной кишки, аденокарцинома желудка, MALT-лимфома) возникают только у 15-20 % инфицированных пациентов. Особенностью этих заболеваний является их благоприятный прогноз при условии их ранней диагностики и полной эрадикации H. pylori. Ведущее значение в диагностике геликобактериоза принадлежит лабораторным методам исследования.

Существует несколько методов выявления H. pylori. Прямые методы позволяют непосредственно выявить сам микроорганизм. Для большинства прямых методов необходим образец ткани слизистой оболочки (биоптат) и/или содержимое желудка и двенадцатиперстной кишки (аспират), которые обычно получают во время эндоскопического исследования. Таким образом, прямые методы исследования, как правило, являются инвазивными. В отличие от этого, непрямые методы выявляют не сам микроорганизм, а косвенные признаки инфекции, например специфические антитела в сыворотке крови (серологические тесты) или содержание меченого атома углерода в выдыхаемом воздухе (дыхательный уреазный тест). Так как для проведения непрямых тестов не требуется эндоскопического исследования, они называются неинвазивными. Как прямые, так и непрямые тесты на H. pylori, имеют свои преимущества и недостатки. Для точной диагностики геликобактериоза требуется сразу несколько тестов. В связи с этим особенно удобным для врача и пациента является комплексный анализ, включающий все необходимые тесты на H. pylori.

Одним из самых чувствительных методов выявления H. pylori является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (РТ-ПЦР). РТ-ПЦР — это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в образце ткани) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Так как анализ основан на выявлении генетического материала, РТ-ПЦР позволяет выявлять присутствие любых форм H. pylori (не только активных спиралевидных, но и неактивных кокковых, некультивируемых), в результате чего исследование характеризуется очень высокой чувствительностью, превосходящей чувствительность метода бактериологического посева. Теоретически для осуществления РТ-ПЦР достаточно присутствие 1 молекулы ДНК. На практике концентрация возбудителя в образце должна составлять около 10-100 КОЕ/мл. Такая высокая чувствительность теста означает, что получение отрицательного результата исследования позволяет исключить H. pylori как причину заболевания. Это имеет принципиальное значение при дифференциальной диагностике НПВС-ассоциированных, стрессовых и ишемических гастритов и язв.

Следует отметить, что, несмотря на очень высокую чувствительность теста (85-98 %), ложноотрицательные результаты все же возможны. Так, например, ложноотрицательный результат может быть получен, если бактериальная нагрузка очень низкая (например, на фоне приема некоторых антибиотиков). Ошибок диагностики можно избежать при комбинации этого прямого теста с серологическими исследованиями.

Инфицирование H. pylori сопровождается значительным нарастанием иммуноглобулинов класса IgG и IgA в сыворотке крови. Эти иммуноглобулины (антитела) определяются в крови с помощью непрямых тестов. IgG обнаруживаются в 95-100 % случаев геликобактериоза, а IgA — в 68-80 %. Исследование позволяет определить титр антител, то есть является количественным. Как правило, высокие титры антител более характерны для активной, текущей инфекции. Следует отметить, однако, что четкой корреляции между титром антител и степенью тяжести инфекции нет.

Серологические тесты, как и метод РТ-ПЦР, имеют некоторые ограничения. Так, результат анализа зависит от особенностей иммунного ответа пациента. Иммунный ответ пациентов, принимающих цитостатические препараты, и пожилых людей характеризуется пониженной выработкой специфических антител (любых, в том числе к H. pylori). По этой причине во избежание диагностических ошибок серологические тесты целесообразно дополнять прямыми тестами. Эта особенность была учтена при составлении комплексного анализа на H. pylori.

Таким образом, комплексный анализ на H. pylori — это комбинация необходимых и достаточных тестов для выявления этого микроорганизма. Комплексный анализ не предназначен для контроля лечения. Результат как РТ-ПЦР, так и исследования иммуноглобулинов IgG и IgA будет оставаться положительными даже в случае полной эрадикации H. pylori. Ложноположительный результат РТ-ПЦР в этом случае обусловлен способностью этого метода выявлять ДНК любых, даже разрушенных микроорганизмов, ложноположительный результат серологических тестов − особенностями динамики иммунного ответа.

Для чего используется исследование?

• Для выявления H. pylori у пациентов с подозрением на гастрит, язву желудка или двенадцатиперстной кишки.

Когда назначается исследование?

• При обследовании пациента с признаками диспепсии: дискомфорт или боли в эпигастральной области, тошнота, рвота, нарушение аппетита.

Что означают результаты?

Референсные значения

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

• [07-027] Helicobacter pylori, IgA (количественно)
• [07-028] Helicobacter pylori, IgG (количественно)
• [09-053] Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Что может влиять на результат?

• Лечение препаратами тетрациклина (доксициклин), пенициллина (ампициллин, амоксициллин), макролидами (азитромицин, эритромицин) и метронидазолом может приводить к получению ложноотрицательного результата;
• иммунный ответ пожилых людей, а также пациентов, получающих иммуносупрессивную терапию, характеризуется пониженной выработкой специфических антител, в том числе к H. pylori, что приводит к большему числу ложноотрицательных реакций теста в этой группе пациентов.

Важные замечания

• Интерпретация результат комплексного анализа должна с особой осторожностью проводиться у пациентов, указывающих на недавнее применение некоторых антибиотиков (тетрациклинов, пенициллинов, макролидов, метронидазола);
• исследование не предназначено для оценки эффективности эрадикационной терапии;
• результаты исследования оценивают с учетом дополнительных анамнестических, инструментальных и лабораторных данных.

Также рекомендуется

[07-127] Helicobacter pylori, антиген

[12-015] Гистологическое исследование биоптатов органов и тканей (за исключением печени, почек, предстательной железы, лимфатических узлов)

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, терапевт, врач общей практики.

Литература

1. Glupczynski Y. Microbiological and serological diagnostic tests for Helicobacter pylori: an overview. Br Med Bull. 1998;54(1):175-86.
2. Athanasios Makrihis, Alexander M. Hirschl, Philippe Lehours, Francis Mégraud,. Diagnosis of Helicobacter pylori Infection. Helicobacter. Volume 9, Issue Supplement s1, pages 7-14, August 2004.
3. M Ashton-Key, T C Diss, and P G Isaacson. Detection of Helicobacter pylori in gastric biopsy and resection specimens. J Clin Pathol. 1996 February; 49(2): 107-111.
4. Monteiro L, Oleastro M, Lehours P, Mégraud F. Diagnosis of Helicobacter pylori infection. Helicobacter. 2009 Sep;14 Suppl 1:8-14.