Определение группы крови и резус-фактора

Содержание

Группа крови (Blood group, АВ0)

Метод определения Фильтрация проб крови сквозь гель, импрегнированный моноклональными реагентами  агглютинация + гель-фильтрация (карточки, перекрёстный метод). При необходимости (обнаружение А2-подтипа) проводится дополнительное тестирование с использованием специфических реактивов.

Исследуемый материал Цельная кровь (с ЭДТА)

Синонимы: Анализ крови на определение группы; Группа крови АВ0; Группа крови по системе АВО; Определение группы крови. ABO Grouping, Blood Typing, Blood Group, Blood Type.

Группа крови — это генетически наследуемый признак, не изменяющийся в течение жизни. Определение групповой принадлежности крови используется в клинической практике при переливании крови и ее компонентов, в гинекологии и акушерстве при планировании и ведении беременности. Система групп крови AB0 является основной системой, определяющей совместимость (или несовместимость) переливаемой крови, так как эти антигены наиболее иммуногенны. Особенностью системы АВ0 является то, что в плазме у неиммунных людей имеются естественные антитела к отсутствующему на эритроцитах антигену. Систему групп крови АВ0 составляют два групповых эритроцитарных антигена − агглютиногены А и В, и два соответствующих антитела − агглютинины плазмы α (анти-А) и β (анти-В). Различные сочетания антигенов и антител образуют четыре группы крови:

группа 0αβ (I) − на эритроцитах отсутствуют групповые агглютиногены, в плазме крови присутствуют агглютинины α и β;
группа Aβ (II) − эритроциты содержат только агглютиноген А, в плазме крови присутствует агглютинин β;
группа Bα (III) − эритроциты содержат только агглютиноген В, в плазме крови содержится агглютинин α;
группа AB (IV) − на эритроцитах присутствуют агглютиногены А и В, плазма крови агглютининов не содержит.

Определение групп крови проводят путем идентификации специфических антигенов и антител (двойной метод или перекрестная реакция).

Несовместимость крови наблюдается, если эритроциты крови донора (реципиента) несут агглютиногены (А или В), а в плазме крови реципиента (донора) содержатся соответствующие агглютинины (α или β), при этом происходит реакция агглютинации. Переливать эритроциты, плазму крови и особенно цельную кровь от донора к реципиенту нужно строго соблюдая групповую совместимость. Лучше всего переливать кровь, эритроциты и плазму той же группы, которая определена у реципиента. В экстренных случаях эритроциты группы 0 (но не цельную кровь!) можно переливать реципиентам с другими группами крови; эритроциты группы А можно переливать реципиентам с группой крови А и АВ, а эритроциты от донора группы В − реципиентам группы В и АВ.

Варианты групповой несовместимости (агглютинация обозначена знаком +)

Кровь донора	Кровь реципиента
0αβ (I)	Aβ (II)	Bα (III)	AB (IV)
0αβ (I)	—	+	+	+
Aβ (II)	+	—	+	+
Bα (III)	+	+	—	+
AB (IV)	+	+	+	—
Эритроциты донора	Кровь реципиента
0αβ (I)	Aβ (II)	Bα (III)	AB (IV)
0 (I)	—	—	—	—
A (II)	+	—	+	—
B (III)	+	+	—	—
AB (IV)	+	+	+	—

Антигены системы АВ0 выявляются не только на эритроцитах, но и на клетках других тканей. Они развиваются на ранних стадиях внутриутробного развития и у новорожденного уже находятся в существенном количестве. Кровь новорожденных детей имеет возрастные особенности − в плазме крови могут отсутствовать характерные групповые агглютинины, которые начинают вырабатываться позже (постоянно обнаруживаются после десяти месяцев), и определение группы крови в этом случае проводится только по наличию антигенов системы АВ0.

Существуют разновидности (слабые варианты) антигена А (в большей степени) и реже антигена В. Что касается антигена А, имеются варианты: сильный А1 (более 80%), слабый А2 (менее 20%), и еще более слабые (А3, А4, Ах − редко). Это теоретическое понятие имеет значение для переливания крови и может вызвать несчастные случаи при отнесении донора А2 (II) к группе 0 (I) или донора А2В (IV) − к группе В (III), поскольку слабая форма антигена А иногда вызывает ошибки при определении группы крови по системе АВ0. Точное определение слабых вариантов антигена А может требовать повторных исследований со специфическими реагентами.

При иммунодефицитных состояниях иногда отмечается снижение или полное отсутствие естественных агглютининов альфа и бета:

новообразования и болезни крови — болезнь Ходжкина, множественная миелома, хроническая лимфатическая лейкемия;
врожденные гипо- и агаммаглобулинемия;
у детей раннего возраста и у пожилых;
иммуносупрессивная терапия;
тяжелые инфекции.

Трудности при определении группы крови вследствие подавления реакции гемагглютинации возникают также после введения плазмозаменителей, переливания крови, трансплатации, септицемии и пр.

Наследование групп крови В основе закономерностей наследования групп крови системы АВ0 лежат следующие понятия. В локусе гена АВ0 возможны три варианта (аллеля) − 0, A и B, которые экспрессируются по аутосомно-кодоминантному типу. Это означает, что у лиц, унаследовавших гены А и В, экспрессируются продукты обоих этих генов, что приводит к образованию фенотипа АВ (IV группа крови). Фенотип А (II группа крови) может быть у человека, унаследовавшего от родителей или два гена А (генотип АА), или гены А и 0 (генотип А0). Соответственно, фенотип В (III группа крови) − при наследовании или двух генов В (генотип ВВ), или В и 0 (генотип В0). Фенотип 0 (I группа крови) проявляется в случае наследования двух генов 0 (генотип 00). Это объясняет, почему в том случае, если оба родителя имеют II группу крови (с возможным генотипом А0), кто-то из их детей может иметь первую группу (генотип 00), или в случае, если у одного из родителей группа крови A (II) (с возможным генотипом А0), а у другого B (III) (с возможным генотипом В0), дети могут иметь не только группы крови А (II) и B (III), но и 0 (I) и АВ (IV).

С какой целью определяют Группу крови

Помимо ситуаций, связанных с необходимостью переливания крови, определение группы крови, резус-принадлежности, определение наличия аллоиммунных (изоиммунных) антиэритроцитарных антител должно проводиться при планировании или во время беременности для выявления вероятности иммунологического конфликта матери и ребенка, который может приводить к гемолитической болезни новорожденных (см. тест № 140).

Гемолитическая болезнь новорожденных — гемолитическая желтуха новорожденных, обусловленная иммунологическим конфликтом между матерью и плодом из-за несовместимости по эритроцитарным антигенам. Болезнь обусловлена несовместимостью плода и матери по D-резус- или АВО-антигенам, реже имеет место несовместимость по другим резус- (С, Е, с, d, e) или М-, М-, Kell-, Duffy-, Kidd-антигенам. Любой из указанных антигенов (чаще D-резус-антиген), проникая в кровь резус-отрицательной матери, вызывает образование в ее организме специфических антител. Последние через плаценту поступают в кровь плода, где разрушают соответствующие антигенсодержащие эритроциты.

Предрасполагают к развитию гемолитической болезни новорожденных нарушение проницаемости плаценты, повторные беременности и переливания крови женщине без учета резус-фактора и др. При раннем проявлении заболевания иммунологический конфликт может быть причиной преждевременных родов или выкидышей.

Литература

Алан Г. Б. Клиническое руководство Тица по лабораторным тестам //М.: Лабора. — 2013. — Т. 1280.
Антонов А. Г. и др. Гемолитическая болезнь плода и новорожденного. Клинические рекомендации //Неонатология: Новости. Мнения. Обучение. — 2018. — Т. 2. — №. 2 (20).
Володина Н. Н., Дегтярева Д. Н., Крючко Д. С. Неонатология //Национальное руководство/под ред. Н. Н. Володина — М.: ГЭОТАР-Медиа. — 2019.
Долгов В. В., Меньшиков В. В. Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство //М.: ГЭОТАР-Медиа. — 2016. — С. 688.
Клинические рекомендации. Гематология. 2019.
Клинические рекомендации. Резус-изоиммунизация. Гемолитическая болезнь плода. — 2020.
Schrader C. M., Billings A. N. False Neonatal ABO Blood Typing due to Contamination of the Cord Blood //AMSRJ. — 2015. — Т. 1. — С. 157-62.

Анализ на группу крови и резус-фактор — комплексное лабораторное исследование, направленное на определение индивидуальных антигенных характеристик эритроцитов и наличие или отсутствие на их поверхности Rh-антигена. Диагностическая процедура назначается для оценки совместимости крови донора и реципиента перед ее переливанием, операцией, трансплантацией органов и тканей, а также для определения наличия резус-конфликта или риска его развития при планировании и ведении беременности. Материалом является венозная кровь. Метод исследования — реакция агглютинации. По результатам анализа определяется принадлежность крови к одной и четырех групп (0, A, B, AB) и наличие или отсутствие резус-фактора (Rh+, Rh-). Подготовка результатов занимает не более 1 рабочего дня.

Группа крови (Blood group, АВ0)

Анализы на группу крови и резус-фактор определяют наличие или отсутствие на эритроцитах антигенов определенного вида, что позволяет установить совместимость крови между донором и реципиентом, матерью и плодом. История этих исследований начинается с 1899 года, когда бельгийский иммунолог и бактериолог Ж. Борде впервые определил, что в пробирке антитела к эритроцитам в присутствии комплемента вызывают агглютинацию красных кровяных клеток и/или гемолиз. С 1901 года американские врачи К. Ландштейнер и Ф. Левин исследовали особенности эритроцитов, в том числе выделенных из крови животных, и открыли существование групп крови. В 1928-1929 годах их исследования были оформлены, гигиенической Лигой Наций было утверждено принятое сейчас разделение групп крови — 0 (I), А (II), В (III) и АВ (IV). Данное открытие привело к распространению процедуры переливания крови в клинической практике, так как она стала более безопасной. В 1940 году К. Ландштейнер и А. Винер открыли существование резус-фактора, определили его роль в развитии эритробластоза плода и осложнений после переливаний крови.

На сегодняшний день тесты на группу крови и резус-фактор являются базовыми изосерологическими исследованиями. Они находят применение в хирургии, трансплантологии, реаниматологии, гематологии, акушерстве и гинекологии. В ходе выполнения анализов определяется набор антигенов, присутствующих на поверхности эритроцитов. Эти антигены разнообразны по своей химической структуре, в настоящее время их выделено несколько десятков. Наиболее изучены и значимы в клинической практике антигены A и B, которые определяют группу крови, а также антиген D, определяющий резус-фактор. Группа крови и резус-фактор являются наследуемыми признаками, они не изменяются в течение жизни.

Исследование группы крови и резус-фактора актуально в ситуациях, когда необходимо переливание крови, а также при беременности, когда существует вероятность попадания эритроцитов плода в кровоток матери. Это связано с тем, что при отсутствии какого-либо антигена в крови реципиента (или матери) введение этого антигена с эритроцитами донора (или плода) приводит к выработке антител. Они разрушают чужеродные красные кровяные тельца, провоцируют развитие иммунологического конфликта по системе ABO или по системе резус-фактора. При переливаниях крови это осложнение проявляется гемолитическими реакциями разной степени тяжести. Если иммунологический конфликт развился при беременности, то повышается риск ее самопроизвольного прерывания, развития гемолитической болезни плода (новорожденного).

Показания

Одно из самых распространенных показаний к анализу на группу крови и резус-фактор — переливание крови. Исследование проводится при подготовке к этой процедуре с целью установления совместимости крови реципиентов и доноров. Часто анализ выполняется в ситуациях, когда высока вероятность того, что потребуется гемотрансфузия — при операциях и инвазивных диагностических вмешательствах, при прохождении службы в вооруженных силах и других структурах, где возможны травмы, ранения. Информация о группе крови и резус-факторе заносится в медицинскую и иную документацию, в критической ситуации позволяет оперативно подобрать кровь донора.

Определение группы крови и резус-фактора показано беременным. Исследование назначается при планировании и мониторинге беременности для предупреждения развития конфликта по системе ABO и по системе резус. Групповой конфликт чаще всего возникает у женщин с I группой крови в парах, где будущий отец имеет II, III или IV группу. Он проявляется гемолитической болезнью новорожденного, которая имеет признаки желтухи и протекает сравнительно легко. Резус-конфликт может развиться у женщин с отрицательным резус-фактором в том случае, если будущий отец имеет резус-положительную кровь. Это осложнение более опасно, чем групповой иммунологический конфликт, может привести к самопроизвольному прерыванию беременности, повреждению некоторых органов плода, гемолитической болезни плода и новорожденного. В группу риска по развитию иммунологических конфликтов обоих типов попадают женщины, имеющие осложнения с увеличением проницаемости плаценты — с отслойкой плаценты, перенесшие серьезные инфекции, травмы живота, инвазивные диагностические процедуры на матке. Во всех этих случаях существует высокий риск проникновения эритроцитов плода в кровоток матери с последующей выработкой антител.

Подготовка и забор крови

Кровь для определения группы и резус-фактора берут из вены. Процедура забора в большинстве лабораторий выполняется с утра. Строгих требований к подготовке нет. Рекомендуется воздержаться от употребления жирной пищи за сутки до анализа, сдавать кровь не менее чем через 4 часа после приема пищи. Некоторые лекарственные средства усиливают реакцию агглютинации и поэтому могут привести к ложноположительным результатам при определении резус-фактора. Необходимость отмены препаратов нужно обсудить с врачом за несколько дней до исследования. За полчаса стоит воздержаться от курения, физических и эмоциональных нагрузок. Кровь берут из локтевой вены методом пункции.

В лаборатории исследования выполняются с помощью методов, основанных на реакции агглютинации. Определение группы крови выполняется тремя основными способами: с использованием изогемагглютиновых сывороток, с использованием изогемагглютиновых сывороток и стандартных клеток крови, а также методом с цоликлонами анти-A и анти-B. Наиболее распространенным является первый вариант. На специальную пластину двумя сериями наносятся стандартные изогемагглютиновые сыворотки I, II и III группы — всего 6 капель. В каждую добавляется исследуемая кровь (или эритроциты) и осторожно перемешивается. Через 5 минут по наличию реакции агглютинации в каплях, то есть по образованию хлопьев, оценивается результат. Если агглютинации нет — первая группа крови, свертывание во всех образцах кроме II в обеих сериях — вторая, свертывание во всех образцах кроме III в обеих сериях — третья, агглютинация во всех образцах — четвертая.

В клинико-лабораторных условиях определение резус-фактора выполняется методом агглютинации в солевой среде, методом конглютинации с использованием желатина, с помощью непрямой пробы Кумбса, реакции с aнти-D-моноклональными антителами. Агглютинация в солевой среде является распространенным диагностическим тестом. Эритроциты пациента вводятся в изотонический раствор хлорида натрия, перемешиваются и помещаются в пробирку с антирезусной сывороткой. В течение одного часа биоматериал инкубируется, после этого исследуется образовавшийся осадок. Если он имеет нитевидный и зернистый рисунок, то резус-фактор положительный, если осадок равномерно распределен по дну пробирки — отрицательный. Определение резус-фактора и группы крови выполняется в течение 1 рабочего дня.

Результаты

В результатах исследования содержится информация о группе крови и резус-факторе. Принадлежность к определенной группе крови устанавливается согласно общепринятой системе ABO:

если агглютиногены A и B на мембране эритроцитов не обнаружены, то группа 0 (I);
если обнаружен агглютиноген A, то группа А (II);
если обнаружен агглютиноген B, то группа B (III);
если обнаружены агглютиногены A и B, то группа AB (IV).

В зависимости от того, присутствует ли на внешней стороне мембран эритроцитов агглютиноген D, делается вывод о резус-факторе. Варианта может быть два: антиген выявлен — резус-положительная кровь (Rh+), не выявлен — резус-отрицательная (Rh-).

Результаты данных исследований учитываются при переливаниях крови и при определении риска иммунологического конфликта между беременной и плодом. Универсальными донорами считаются лица, имеющие первую группу крови и отрицательный резус-фактор — 0 (I) Rh-, так как у них отсутствуют все три вида антигенов и, следовательно, выработка антител у донора не произойдет. Универсальные реципиенты — лица, имеющие четвертую группу крови и положительный резус-фактор — AB (IV) Rh+. На эритроцитах их крови имеются все три вида антигенов, значит, при попадании любого из них вместе с эритроцитами донора производство антител не будет запущено.

Значение исследования

Анализы на группу крови и резус-фактор являются базовыми изосерологическими исследованиями. Они находят применение при подготовке пациентов к переливаниям крови, к хирургическим операциям, при планировании и контроле беременности. Типирование крови необходимо лицам, поступающим на военную службу и в другие силовые структуры. Учет группы крови и резус-фактора при гемотрансфузиях и мониторинге беременности позволяет предупредить развитие иммунологических конфликтов по системе ABO и по системе резус-фактора, избежать возникновения тяжелых осложнений, таких как острая гемолитическая реакция, гемолитическая болезнь новорожденного, выкидыш. При выполнении анализов в плановом режиме с результатами необходимо обратиться к лечащему врачу — терапевту, акушеру-гинекологу — для того чтобы данные были занесены в медицинские документы и могли быть использованы в дальнейшем.

Литература:

ОФС.1.2.1.1.0003.15 Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях // Государственная фармакопея, XIII изд.
Haeser, «Handbuch der Gesch. d. Medicin».
М.П. Киселева, З.С. Смирнова, Л.М. Борисова и др. Поиск новых противоопухолевых соединений среди производных N-гликозидов индоло[2,3-а] карбазолов // Российский онкологический журнал. 2015. № 1. С. 33-37.
https://www.invitro.ru/analizes/for-doctors/479/2860/.
https://www.KrasotaiMedicina.ru/lab-test/isoserology/Rh-blood-group.
З.С. Смирнова, Л.М. Борисова, М.П. Киселева и др. Противоопухолевая эффективность прототипа лекарственной формы соединения ЛХС-1208 для внутривенного введения // Российский биотерапевтический журнал. 2012. № 2. С. 49.
М.П. Киселева, З.С. Смирнова, Л.М. Борисова и др. Поиск новых противоопухолевых соединений среди производных N-гликозидов индоло[2,3-а] карбазолов // Российский онкологический журнал. 2015. № 1. С. 33-37.