Анализ крови на гемоглобин

Содержание

Гемоглобин

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, приведенная ниже информация носит исключительно справочный характер

Гемоглобин: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

Гемоглобин — сложный белок, основной компонент эритроцитов, переносящий кислород от легких ко всем тканям организма и участвующий в выведении углекислого газа из клеток организма.

Молекула гемоглобина состоит из гема (небелковой части) и глобина (белковой части, которая содержит в своей молекуле четыре полипептидные цепи: две альфа-цепи и две бета-цепи). К каждой из четырех глобиновых субъединиц прикреплена группа гема с атомом железа.

В норме в крови можно обнаружить несколько форм гемоглобина, отличающихся друг от друга белковой частью (количественным или качественным составом аминокислот, входящих в состав глобина):

эмбриональный (встречается у плода до 2 месяцев внутриутробного развития);
фетальный (образуется со 2 месяца внутриутробного развития, циркулирует до рождения, разрушается в первую неделю жизни);
зрелый гемоглобин.

При взаимодействии гемоглобина с различными веществами, способными связываться с его активным центром, возникают производные гемоглобина. В зависимости от того, что присоединил гемоглобин, выделяют формы:

HbО2 — соединение с кислородом (оксигемоглобин);
HbСО2 — гемоглобин с углекислым газом (карбогемоглобин);
HbMet — гемоглобин с окисленным железом (метгемоглобин);
HbCO — карбоксигемоглобин, образующийся при отравлении угарным газом;
HbA1С — гликозилированный гемоглобин при сахарном диабете.

Наряду с нормальными формами гемоглобина могут существовать мутантные или патологические. Известно более 300 форм патологических гемоглобинов.

Наиболее часто находят:

HbS — гемоглобин при серповидно-клеточной анемии;
гемоглобин Kempsey при полицитемии;
гемоглобин Hammersmith и др.

Производные и патологические формы гемоглобина определяют с целью диагностики различных заболеваний и в ходе динамического наблюдения за их течением (например, показатель гликозилированного гемоглобина отражает усредненное содержание глюкозы крови за три предшествующих месяца).

Срок жизни эритроцитов, сухое вещество которых на 90-95% состоит из гемоглобина, составляет 110-120 дней. Разрушение эритроцитов происходит в селезенке, небольшая часть гемоглобина распадается в красном костном мозге и звездчатых клетках печени.

Определение концентрации гемоглобина в рамках исследования клинического анализа крови — один из важнейших диагностических методов. Расчетный показатель, отражающий среднее содержание гемоглобина в 1 клетке (эритроците) используется для дифференциальной диагностики анемий.

Концентрацию гемоглобина определяют в рамках профилактического, диспансерного наблюдения при первичном обследовании с целью выявления заболеваний, при госпитализации в стационары терапевтического и хирургического профилей.

Определение количественного содержания гемоглобина используется в комплексе с другими гематологическими показателями (величиной гематокрита, количеством эритроцитов, эритроцитарными индексами) для диагностики ряда патологических состояний: анемии, эритремии и вторичных эритроцитозов, для оценки степени дегидратации организма, определения тяжести кровопотери при геморрагических состояниях, оценки эффективности гемотрансфузий в процессе терапии, определения тяжести состояния пациента при воспалительных, инфекционных заболеваниях, а также для мониторинга проводимой терапии и течения различных заболеваний.

Подготовка к процедуре

Кровь рекомендуется сдавать утром с 8 до 11 часов, натощак (не менее 8 часов голода, пить воду можно в обычном режиме).
Сообщите врачу о принимаемых вами лекарственных препаратах.
Исключите прием алкоголя накануне исследования, не курите в течение 1 часа до исследования.
Исключите физические и эмоциональные перегрузки накануне исследования.
После прихода в лабораторию отдохните 10-20 минут перед взятием крови.
Нежелательно сдавать кровь для лабораторного исследования вскоре после физиотерапевтических процедур, инструментальных обследований и других медицинских вмешательств.
При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях: в одной лаборатории (тем же методом), примерно в одинаковое время суток и т. п.

Гликированный гемоглобин (HbA1С, Glycated Hemoglobin)

Соединение гемоглобина с глюкозой, позволяющее оценивать уровень гликемии за 1 — 3 месяца, предшествующие исследованию. Образуется в результате медленного неферментативного присоединения глюкозы к гемоглобину А, содержащемуся в эритроцитах. Гликированный (употребляется также т…

715 руб

Срок исполнения

1 рабочий день, исключая день взятия биоматериала.

Что может повлиять на результат

В случае несоблюдения правил подготовки полученный результат может быть некорректным.

Уровень гемоглобина может быть повышенным после длительного пребывания в высокогорье. Пониженный уровень гемоглобина регистрируется у беременных, вегетарианцев, после нескольких подряд эпизодов сдачи крови.

Сдать анализ крови на гемоглобин можно в ближайшем медицинском офисе ИНВИТРО. Список офисов, где принимается биоматериал для лабораторного исследования, представлен в разделе «Адреса».

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т. д.

Исследуемый материал: цельная кровь (с ЭДТА).

Единицы измерения: г/дл.

Альтернативные единицы измерения: г/л.

Коэффициент пересчета: г/л х 0,1 ==> г/дл.

Определение концентрации гемоглобина в крови проводят в ходе исследования клинического анализа крови.

Анализ крови. Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ) (Complete Blood Count, CBC);

Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при наличии патологических сдвигов);

Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ (с обязательной «ручной» микроскопией мазка крови);

Нормальные показатели

Дети

Возраст	Показатель гемоглобина, г/дл
1 день — 14 дней	13,4 — 19,8
14 дней — 4,3 недели	10,7 — 17,1
4,3 недели — 8,6 недель	9,4 — 13,0
8,6 недель — 4 месяца	10,3 — 14,1
4 месяца — 6 месяцев	11,1 — 14,1
6 месяцев — 9 месяцев	11,4 — 14,0
9 месяцев-12 месяцев	11,3 — 14,1
12 месяцев — 5 лет	11,0 — 14,0
5 лет — 10 лет	11,5 — 14,5
10 лет — 12 лет	12,0 — 15,0

Возраст	Показатель гемоглобина, г/дл
Девушки	Юноши
12 лет — 15 лет	11,5 — 15,0	12,0 — 16,0
15 лет — 18 лет	11,7 — 15,3	11,7 — 16,6

Взрослые

Возраст	Женщины	Мужчины
18 лет — 45 лет	11,7 — 15,5	13,2 — 17,3
45 лет — 65 лет	11,7 — 16,0	13,1 — 17,2
> 65 лет	11,7-16,1	12,6-17,4

Расшифровка показателей

Гемоглобин у новорожденных выше, чем у взрослых. В течение первого года жизни происходит его постепенное снижение, а затем уровень гемоглобина опять возрастает. В норме показатель гемоглобина у женщин ниже, чем у мужчин.

Что значат пониженные результаты

Снижение гемоглобина может свидетельствовать об анемии, развивающейся в результате различных причин (острых и хронических кровопотерь; недостатка фолиевой кислоты, витамина В12, железа; неполноценного питания; поражения костного мозга с угнетением его функции; нарушения регуляции образования эритроцитов при уменьшении продукции гормона, стимулирующего рост и размножение эритроцитов; повышенного разрушения эритроцитов под воздействием различных причин или генетических дефектов; хронических воспалительных, инфекционных заболеваний).
Еще одна причина падения уровня гемоглобина — гипергидратация (избыточное содержание воды в организме).

Что значат повышенные результаты

Повышение уровня гемоглобина регистрируется при обезвоживании, вызванном острой диареей, многократной рвотой, повышенным потоотделением, диабетом, обширными ожогами.
Физиологические эритроцитозы отмечаются у жителей высокогорья, летчиков, спортсменов.
Симптоматические эритроцитозы диагностируются при дыхательной и/или сердечно-сосудистой недостаточности, поликистозе почек, а также у курильщиков.
Для эритремии (разновидность хронического лейкоза), онкологических заболеваний также характерно снижение уровня гемоглобина.
К снижению гемоглобина приводит передозировка или неправильное применение препаратов рекомбинантного эритропоэтина.

Дополнительное обследование при отклонении от нормы

При отклонении от нормы концентрации гемоглобина в крови может быть назначено дополнительное обследование.

С целью диагностики анемии:

ретикулоциты;

Ретикулоциты (Reticulocytes)

Синонимы: Количество ретикулоцитов; Подсчет количества ретикулоцитов; Ретикулоцитарный индекс. Retic count; Reticulocyte index; Corrected reticulocyte; Reticulocyte count. Краткое описание исследования «Ретикулоциты» Непосредственные предшественники зрелых эритроцитов. Это …

365 руб

тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио);

Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)

Синонимы: Тромбоциты, микроскопия (метод Фонио). Manual Platelet Count (PLT count): Indirect Method by Fonio. Краткое описание теста «Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)» Подсчет тромбоцитов входит в состав общего анализа крови и обычно пр…

260 руб

Эритропоэтин (Erythropoetin)

Важнейший регулятор эритропоэза. Эритропоэтин — гликопротеиновый гормон, вызывающий повышение продукции эритроцитов. У взрослого человека он образуется преимущественно в почках, а в эмбриональном периоде практически полностью — в печени плода. Уменьшение содержания доступного кислоро…

1 435 руб

Трансферрин (Сидерофилин, Transferrin)

Синонимы: Переносчик железа; Сидерофилин. Siderophilin,Transferrin; Tf. Краткая характеристика определяемого вещества Трансферрин Плазменный белок, гликопротеин — основной переносчик железа. Синтез трансферрина осуществляется в печени и зависит от функционального состояния печени…

680 руб

латентная (ненасыщенная) железосвязывающая способность сыворотки крови;

Железо сыворотки (Fe serum, Iron serum)

Синонимы: Железо сывороточное. Serum Iron, Serum Fe, Iron, Fe. Краткая характеристика определяемого вещества (Железо сыворотки крови) Жизненно важный микроэлемент, участвующий в процессе связывания, переноса и передачи кислорода в ткани и в процессах тканевого дыхания. Железо входит в состав …

315 руб

Фолиевая кислота (Folic Acid)

Фолиевая кислота − витамин, необходимый для нормального синтеза ДНК (особенно в онтогенезе) и процессов кроветворения. Синонимы: Витамин В9; Фолацин; Птериолглутаминовая кислота. Vitamin B9; Vitamin Bc; Folic Acid; Folacin; Pteroylglutamic Acid. Краткая характеристика о…

1 040 руб

С целью диагностика заболеваний желудочно-кишечного тракта:

анализ кала на простейшие;

Анализ кала на простейшие (PRO s)

Наибольшее значение имеет обнаружение в кале следующих простейших (intestinal protozoa), вызывающих заболевания у человека: Entamoeba Histolytica (дизентерийная амеба) вызывает амёбиаз. Встречается в кишечнике человека в двух формах. Тканевая форма вызывает изъязвление стенок кишечника. Нали…

495 руб

Анализ на энтеробиоз (яйца остриц, enterobiasis), тампон

Энтеробиоз — гельминтоз, клиническими проявлениями которого являются перианальный зуд и кишечные расстройства. Возбудитель — острица (Enterobius vermicularis или Охуuris vermicularis). Это мелкая нематода, которая обитает в толстом кишечнике, а выползая из прямой кишки, откладывает яйца…

460 руб

Обследования, направленные на выявление поражений внутренних органов:

оценка показателей работы почек (мочевина, креатинин, клубочковая фильтрация);

Креатинин (в крови) (Creatinine)

Синонимы: Сывороточный креатинин; Креатинин сыворотки (с расчетом СКФ); 1-метилгликоциамидин. Creatinine; Creat; Cre; Blood creatinine; Serum creatinine; Serum Creat. Краткое описание определяемого аналита Креатинин Азотистый метаболит, конечный продукт превращения креатинфосф…

310 руб

Мочевина (в крови) (Urea)

Синонимы: Диамид угольной кислоты; Карбамид; Мочевина в крови; Азот мочевины. Urea nitrogen; Urea; Blood Urea Nitrogen (BUN); Urea; Plasma Urea. Краткая характеристика аналита Мочевина Мочевина является основным азотсодержащим продуктом катаболизма белков и аминокислот в организме человека. …

310 руб

оценка показателей работы печени (билирубин, АЛТ, АСТ);

ультразвуковое исследование органов ЖКТ.

Источники:

Хиггинс К. Расшифровка клинических лабораторных анализов. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2010. — 456 с.
Дементьева И.И., Чарная М.А., Морозов Ю.А. Анемии: руководство. — М.: ГЭОТАР — Медиа, 2013. — 304 с.

ВАЖНО!

Информация проверена экспертом

Гемоглобин

Лишова Екатерина Александровна

Высшее медицинское образование, опыт работы — 19 лет

Поделитесь этой статьей сейчас

Гемоглобин

Определение гемоглобина в крови — клиническое исследование, направленное на измерение количества белка эритроцитов, отражающего состояние кислородного обмена между легкими и тканями организма. Исследование концентрации гемоглобина проводится в рамках общего анализа крови, при интерпретации результатов учитываются другие показатели. Данные используются для определения тяжести анемии, полицитемии, оценки эффективности терапии этих заболеваний, а также для мониторинга состояния здоровья, для подготовки к операциям. Забор крови производится из капилляров или вены, анализ выполняется колориметрическим методом. Показатели нормы гемоглобина в крови для мужчин — 135-160 г/л, для женщин — 120-140 г/л. Готовность результатов анализа составляет один рабочий день.

Гемоглобин — хромопротеин, входящий в состав эритроцитов. По своей структуре он относится к сложным белкам, состоит из четырех субъединиц, каждая из которых представлена гемом — пигментным компонентом и глобином — аминокислотной цепью с атомом железа. Основной функцией гемоглобина является перенос кислорода от легких к тканям. Четвертичная структура белка обеспечивает способность к присоединению и отщеплению молекул О2. В норме единица гемоглобина способна транспортировать 4 атома кислорода, такой комплекс называется оксигемоглобином. Из тканей гемоглобин берет водород и углекислый газ, переносит их к легким. Такие комплексы называются дезоксигемоглобином. Оксигемоглобин и дезоксигемоглобин — две устойчивые формы белка, которые присутствуют в составе эритроцитов в норме.

Если гемоглобин связывается с окисью углерода (CO), образуется стабильный комплекс карбоксигемоглобин, который неспособен переносить кислород. Такое патологическое состояние наблюдается при отравлении углекислым газом. При некоторых наследственных заболеваниях, отравлении окисью азота, цианидом железо гемоглобина меняет валентность — образуется метгемоглобин, неспособный присоединять к себе молекулы кислорода. При сниженном уровне нормальных форм гемоглобина в крови развивается анемия — состояние, при котором ткани организма не снабжаются достаточным количеством кислорода, что приводит к утомляемости, слабости, снижению функций практически всех органов. Кроме этого, недостаток гемоглобина может быть связан с низким уровнем эритроцитов, вызванным их усиленным разрушением, уменьшением производства в красном костном мозге или потерей в результате кровотечений.

Таким образом, уровень гемоглобина в крови — показатель анемии. Материалом для анализа является венозная кровь. Наиболее распространенный метод исследования концентрации гемоглобина — колориметрия. Результаты находят применение во многих сферах медицинской практики, наиболее востребованы в терапии, педиатрии, гематологии, нефрологии и хирургии.

Показания

Тест на гемоглобин в крови часто выполняется в рамках общего анализа крови при профилактических обследованиях, медицинских осмотрах в учебных учреждениях, в армии, на производстве. Результаты выявляют анемию и риск ее развития, позволяют провести необходимую дополнительную диагностику, мероприятия по предупреждению болезни и ее устранению на ранних этапах. Кроме этого, исследование гемоглобина в крови показано при симптомах анемии — когда пациент быстро устает, легко утомляется, постоянно чувствует сонливость, испытывает головную боль, головокружения, не высыпается, не может сконцентрироваться на работе, с трудом запоминает новую информацию, чувствует покалывание и онемение в руках и ногах. При осмотре определяется бледность кожных покровов, трещинки в уголках губ, сухость и тусклость волос, боли в области языка.

При проведении общего анализа крови показатель гемоглобина выявляет анемию при различных состояниях и заболеваниях: при кровопотерях, в том числе менструальных, при недостатке витамина B12 и фолиевой кислоты, при хронической форме почечной недостаточности, болезни Крона, гипотиреозе, глютензависимой энтеропатии, гастрите и язве желудка, онкологических поражениях, патологиях крови и т. д. Поэтому список показаний для определения уровня гемоглобина в крови очень широк. В редких случаях основанием для проведения исследования становятся симптомы, характерные для повышенного уровня гемоглобина в крови. Такое состояние называется полиглобулией и проявляется покраснением кожи, посинением области носогубного треугольника, головными болями и головокружениями, снижением зрения, чувством тяжести в области подреберья, одышкой, кожным зудом.

Анализ на гемоглобин в крови определяет наличие анемии и ее выраженность, но не указывает на причину. Для более полного обследования дополнительно назначается тест на ферритин, железо сыворотки крови, трансферрин, эритропоэтин, ОЖСС. При интерпретации результатов учитываются такие показатели общего анализа крови как уровень эритроцитов, эритроцитарные индексы (MCV, MCH, MCHC), гематокрит, СОЭ. Преимуществом теста на гемоглобин является его доступность и экономичность процедуры исследования — анализ выполняется в любой лаборатории, подготовка результатов занимает не больше 1 дня.

Подготовка к анализу

Забор крови для определения уровня гемоглобина выполняется с утра. Между последним приемом пищи и процедурой рекомендуется выдержать 8-12 часов. Допустимо сдавать кровь спустя 4-6 часов после легкого перекуса. За 1 день до анализа важно воздержаться от употребления алкоголя. Последние полчаса нужно провести в спокойной обстановке, без физической и эмоциональной нагрузки, отказавшись от курения. За несколько дней до анализа стоит обсудить с врачом необходимость отмены принимаемых лекарственных препаратов.

Уровень гемоглобина определяется в крови, взятой из капилляров или из вены. В первом случае производится прокол безымянного пальца, во втором — пункция локтевой вены. В настоящее время в лабораториях используются колориметрические методы исследования: гемиглобинцианидный (HbCN), гемихромный (HbChr) и гемиглобиназидный (HbN3). Их суть заключается в том, что гемоглобин взаимодействует с реагентом, в результате чего образуется окрашенное соединение. По оптической плотности полученной смеси рассчитывается концентрация исследуемого белка. Анализ выполняется в течение 1 рабочего дня.

Нормальные значения

Нормальный уровень гемоглобина у юношей старше 16 лет и мужчин составляет 135-160 г/л. У женщин показатели распределяются в коридоре от 120 до 140 г/л, причем в начале менструального цикла они приближаются к нижней границе, в середине и в конце — к верхней. В детском возрасте нормальные показатели гемоглобина постоянно изменяются, определять их нужно индивидуально. У новорожденных в первые три дня концентрация белка колеблется от 145 до 225 г/л. Затем она постепенно снижается:

3-7 дней — от 135 до 215 г/л;
1-2 недели — от 125 до 205 г/л;
2-4 недели — от 100 до 180 г/л;
1-3 месяца — от 90 до 140 г/л;
3-6 месяцев — от 95 до 135 г/л;
с 6 до 12 месяцев — от 100 до 140 г/л;
1-2 года — от 105 до 145 г/л;
2-7 лет — от 110 до 150 г/л;
7-16 лет — от 115 до 155 г/л.

Как видно из приведенных норм, в период новорожденности уровень гемоглобина наиболее высок. По своим свойствам этот белок отличается от гемоглобина у взрослых людей, его называют фетальным. При отсутствии нарушений со стороны системы крови в течение первого года жизни он полностью исчезает. Концентрация гемоглобина в крови растет при кислородном голодании, связанном с подъемом на большую высоту или с курением. Физиологическое понижение уровня белка происходит во время беременности, при соблюдении вегетарианской диеты, сразу после забора крови для анализа.

Повышение гемоглобина

Причиной полиглобулии или повышенного уровня гемоглобина в крови может стать истинная полицитемия — болезнь, при которой опухолевые клетки в красном костном мозге вырабатывают избыточное количество эритроцитов. Такая патология чаще диагностируется в пожилом и старческом возрасте. Концентрация эритроцитов, а, следовательно, и гемоглобина, увеличивается при вторичной полицитемии. Она развивается при кислородном голодании, вызванном патологиями сердечно-сосудистой или дыхательной системы — хронической обструктивной болезнью легких, эмфиземой, пневмокониозом, артериовенозными фистулами, врожденным пороком сердца и т. д.

При заболеваниях почек причиной повышенного уровня гемоглобина в крови становится усиленная выработка эритропоэтина — вещества, усиливающего производство эритроцитов в красном костном мозге. Увеличение показателей анализа определяется при раке почки, гипернефроме, поликистозе почек. После удаления селезенки некоторое повышение уровня гемоглобина связано с более долгим сроком жизни эритроцитов, при обезвоживании — со сгущением крови, повышением гемоконцентрации.

Снижение гемоглобина

Одной из наиболее распространенных причин снижения уровня гемоглобина в крови являются анемии. Заболевания этой группы различны по происхождению, но для всех них характерно недостаточное снабжение тканей кислородом. В основе нарушения транспортной функции эритроцитов может лежать дефицит железа, фолиевой кислоты и/или витамина B12, усиленный распад красных кровяных телец, длительные воспаления в организме, приводящие к задержке железа в тканях, гипотиреоз, нарушение производства гемоглобина. К другим причинам снижения уровня гемоглобина в крови относятся острые и хронические кровотечения, заболевания соединительной ткани, хронические болезни почек, цирроз печени, нарушение функций щитовидной железы, распад эритроцитов на фоне инфекций и отравлений некоторыми видами ядов.

Лечение отклонений от нормы

Тест на гемоглобин входит в состав общего анализа крови. Он является простым и доступным методом первичного выявления анемий, полицитемий, состояний кислородного голодания. В клинической практике часто используется в рамках скрининговых и профилактических обследований. С результатами анализа необходимо обратиться к врачу — к терапевту, педиатру, гематологу или другому специалисту, направившему на обследование. Чтобы избежать физиологического повышения или снижения уровня гемоглобина, нужно полноценно питаться, употребляя источники железа, витамина B12, фолиевой кислоты, а также отказаться от курения, физических нагрузок, не соответствующих уровню подготовленности.

Литература:

Renouard, «Histoire de la medicine» (П., 1948).
Guardia, «La Médecine à travers les âges».
Харенко Е. А., Ларионова Н. И., Демина Н. Б. Мукоадгезивные лекарственные формы. Химико-фармацевтический журнал. 2009; 43(4): 21–29. DOI: 10.30906/0023-1134-2009-43-4-21-29.
https://www.invitro.ru/library/labdiagnostika/26314/.
https://www.KrasotaiMedicina.ru/lab-test/blood/hemoglobin.
М.П. Киселева, З.С. Смирнова, Л.М. Борисова и др. Поиск новых противоопухолевых соединений среди производных N-гликозидов индоло[2,3-а] карбазолов // Российский онкологический журнал. 2015. № 1. С. 33-37.
Мирский, «Медицина России X—XX веков» (Москва, РОССПЭН, 2005, 632 с.).
М.П. Киселева, З.С. Шпрах, Л.М. Борисова и др. Доклиническое изучение противоопухолевой активности производного N-гликозида индолокарбазола ЛХС-1208. Сообщение I // Российский биотерапевтический журнал. 2015. № 2. С. 71-77.
Patil H., Tiwari R. V., Repka M. A. Recent advancements in mucoadhesive floating drug delivery systems: A mini-review. Journal of Drug Delivery Science and Technology. 2016; 31: 65–71.DOI: 10.1016/j.jddst.2015.12.002.